●RealTime PCR 产品资料
THUNDERBIRD® Next SYBR® qPCR Mix是将以往THUNDERBIRD® qPCR Mix产品的组分大幅改良后的产品。通过提升PCR效率,抑制非特异反应(引物二聚体等的产生),可以获得更广的可定量区域。
本产品为2倍浓度的预混试剂,除引物以外的成分已预先混合。此外,对RealTime反应及信号无影响,有蓝色染料着色,吹打时易于分辨,防止分装错误。
THUNDERBIRD® Next SYBR® qPCR Mix是含有根据SYBR® Green I检测系列为RealTime PCR通用型passive reference dye预混试剂。在实现反应液配制简便化的同时,将样本间荧光强度误差抑制到最小,可得到高度再现性的结果。
●提高扩增效率
改良组分以提升PCR効率
●提高低拷贝域的检测感度
高效率,尤其特异的扩增,可以进行广泛的测序分析。
●高特异性
最优化的组分,提高PCR的特异性。降低非特异反应,可检测出低浓度的目的片段,提升可信性。
●可用于延伸时间10秒的高速循环
●提升配制后反应液的稳定性
引物,模板混合后的PCR反应液具有高稳定性,即使样本数多需要花费长时间配制也能得到稳定的结果。
●防止因携带污染造成的伪阳性
本产品组分中含有dUTP。
添加另售的Uracil-N-Glycosylase(UNG),Heat-labile[Code No. UNG-101],可以防止携带污染造成的伪阳性。
●含有补正用色素,无需添加ROX
通常,用于一般需要补正的仪器中也无需添加ROX。此外,含有的补正用色素,不会影响SYBR® Green I的检测,因此可以用于各类仪器。
●着色原因,降低分装失误
有蓝色染料着色,吹打时易于分辨,防止分装错误。
【QPX-201T】
THUNDERBIRD® Next SYBR® qPCR Mix
1mL×1支
【QPX-201】
THUNDERBIRD® Next SYBR® qPCR Mix
1.67mL×3支*
*含有passive reference dye
本产品含有蓝色染料。
分装完成后的well为蓝色,可降低分装失误。
该染料对qPCR反应及信号没有影响。
灭菌水 XμL
THUNDERBIRD® Next SYBR® qPCR Mix 10μL
Forward Primer 6pmol
Reverse Primer 6pmol
UNG*[Code No:UNG-101] 0.4U
DNA样本 YμL
Total Volume 20μL
(UNG*反应 20~25℃ 10min.)
*本产品中不含UNG。使用另售的Uracil-DNA Glycosylase(UNG),Heat-labile[Code No. UNG-101]时的温度条件及反应时间已在实验例1中标示。
〈2step PCR〉: 高速
95℃, 30sec.
↓
95℃, 5sec.
60℃, 10sec.*
40 cycles
*有的仪器可能无法设置延伸时间为10秒
〈2step PCR〉: 普通
95℃, 30sec.
↓
95℃, 5sec.
60℃, 30sec.
40 cycles
〈3step PCR〉: Tm低于一般Tm(60℃),或无法充分扩增时,可以试用此方法。
95℃, 20~60sec.
↓
95℃, 1~5sec
55~65℃, 5~30sec.
72℃, 10~60sec.
40 cycles
SYBR® 为Molecular Probes Inc的注册商标。
关于保存
经确认,可反复冻融10次,对品质没有影响。
融解后在大约3个月以内,可在2~8°C冷藏条件下保存。
长期不用的情况下,请于-20°C下再次冻结保存。
为了防止SYBR® Green I的荧光减退,请注意遮光保存。