价格表
| Code No. | 包装 | 价格 | 保存温度 | 说明书 |
|---|---|---|---|---|
| DTM-101 | 100次份 | RMB375 | -20℃ |
|
用途
PCR
说明
只要加入模板DNA及引物，即可进行PCR，反应产物可直接进行电泳分析。 预先将Taq抗体加入到Master Mix中,通过热启动效果,可进行高特异性、高效率扩增。 |  |
特征
●2×Pre Mix(添加染料)
本品为2×Master Mix,只需要加入模板和引物，即可方便地使用。由于预混了染料(BPB)，PCR后可直接用于电泳上样。
●优良的PCR性能
通过使用优化的Buffer组分及高纯度的Taq DNA polymerase，与原来的Taq DNA polymerase相比，PCR性能有了大幅度提高。
●采用热启动PCR
采用使用抗Taq DNA polymerase抗体的热启动法，显示了高灵敏和高特异性。
●保存稳定性高
经验证，反复冻融30次、4℃状态下保存3个月对品质没有影响。
●高性价比
价格低，可轻松地进行高效率PCR。
实验例
1. 使用直接克隆PCR进行插入片段的检测
用含有500bp插入片段的质粒pTA2进行转化大肠杆菌DH5α，以得到的克隆为样品，在载体上设计引物进行PCR。
结果显示，可以得到跟插入片段长度相同的明亮的条带。
由此可见，使用本品进行直接克隆PCR，也可以得到良好的结果。
2. 人p53基因(2.9 kb)的扩增
以人基因组DNA(50ng)为模板，以较难扩增的人p53基因(2.9kb)为目的片段进行扩增。结果可见，使用Quick Taq HS Dye Mix可得到最高效率和最高特异性。另外，可知在不采用热启动法的情况下(3、4泳道)，特异性及灵敏度都很低(Quick Taq HS Dye Mix采用热启动法)。
3. 各种条件下扩增效率的比较
以人基因组DNA (50ng)及大肠杆菌菌落为模板，扩增人的β-globin基因(1.3kb, 3.6kb)、及质粒插入片段(3.9kb)。
反应分别按各试剂的最适条件进行。
结果显示，使用Quick Taq HS Dye Mix时，可进行高效率且高特异性地扩增。
Quick Taq HS Dye Mix1.25ml×2管
※50μl反应体系，可使用100次。
组分如下：
rTaq DNA Polymerase
抗Taq酶的抗体
dNTPs
电泳染料(BPB)
Reaction Buffer
灭菌蒸馏水Xμl
2×Quick Taq HS Dye Mix25μl
10pmol /μl Primer F1.0μl
10pmol /μl Primer R1.0μl
Genomic DNA(50ng/μl) ～200ng
Plasmid DNA ～50ng
菌落(※请参考实验例)
< 2步法循环>*
94℃ 2min.
↓
94℃ 30sec.
68℃ 1min./kb 25～40 cycles
< 3步法循环>*
94℃ 2min.
↓
94℃ 30sec.
(Tm-5)℃ 30sec.
68℃ 1min./kb 25～40 cycles
*引物的Tm值低于73℃时，推荐使用3步法循环。
参考文献
1) F. C. Lawyer et al., J. Biol. Chem., 264: 6427-6437(1989)
2) D. E. Kellogg, et al., BioTechniqus, 16: 1134(1994)
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