即使在低拷贝区域也可高效率且特异地扩增,可在较广的测定范围内进行分析。
【1个拷贝的扩增确认】
可扩增1个拷贝的目的片段时,可认为1个拷贝的检测数与泊松分布的设定检测数相同。泊松分布的理论值中,0拷贝数的概率为37%、1个以上拷贝数的概率为63%。
因此,使用THUNDERBIRD Next SYBR qPCR Mix,以稀释的1个拷贝的沙门氏菌基因组为模板,N=96进行检测。结果显示,未检测出的为38.5%,检测出的为61.5%,与根据泊松分布推测的检出率相同,这表明检测到了1个拷贝相当的模板。