KOD FX
实验例17～20

【基因名】PGK neo
【样品】Mouse genomic DNA 5~10ng
【目的片段长】1.5kb
【引物】30mer, 0.4μM (final)
【循环】
KOD FX：　 　
94℃ 2min , (98℃ 10sec, 68℃ 90sec)x30
A公司Long PCR酶：

94℃ 2min, (94℃ 30sec, 60℃ 2min)x30, 72℃ 2min 

【数据提供】
东京大学研究生院　医学系研究科　细胞分子药理学教室　(饭野研究室)
金丸 和典 老师

【来自老师的评语】
用原有的产品比较难扩增的目的片段，用KOD FX可得到明亮的检测结果，非常吃惊。而且用KOD FX非特异性扩增也消失了。

【基因名】Chick GAD67 的Promoter区域
【样品】Chick kidney genomic DNA 0.1μg
【目的片段长】6273bp
【引物】
  F primer：TCAGGTTGGTGTTCTCTCACTG 22mer
  R primer：TCAGCGCGGGTTGAAAGGAAGC 22mer
【循环】
  KOD FX： (98,10sec- 68,7min) x35 cycles
  KOD FX以外：推荐条件 

【数据提供】
京都大学医学部神经生物学教研室(第一生理学教室)
石井 孝广 老师

【来自老师的评语】
 原来完全无法扩增的目的片段得到了扩增。
 克隆化后，可确认序列相符。 

【基因名】Mouse BMP-2
【样品】Mouse genome BAC clone DNA 0.1μg
【目的片段长】约2kb(包含GC-rich区域)
【引物】20mer、1μM(final)
【循环】
 KOD FX：
  (98℃,10sec-68℃,2min)×35cycles
  A公司Long PCR酶：
  (94℃,1min-60℃,30sec-72℃,2min)×35cycles 

【数据提供】
 鸟取大学医学部生命科学科分子生物学
 安永 茉由 老师、佐藤 建三 老师

【来自老师的评语】
 同样的实验以前失败过好多次，用KOD FX一次性就顺利地取得了成功。
 同时需要说明的是，用A公司酶扩增得到的约2kb的条带，经测序，是别的基因。

【基因名】原癌基因(proto oncogene)c-mos
【样品】Plasmid DNA 5ng
【目的片段长】约4.5kb
【引物】32mer、0.2μM (final)
【循环】
 KOD FX：
  95℃,3min- (95℃,30sec-55℃,1min-72℃,4min)×20cycles- 72℃,7min
  A公司高保真性酶：推荐条件

【数据提供】
 东京工业大学研究生院生命理工学研究科 生命信息专业
 立花 和则 老师

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