KOD FX对小鼠滤纸血进行PCR分析









【样品】
小鼠血液


【前处理】








【目的片段】
CIITA   450 bp



【引物】
均为21mer



【反应液组成】


 dH2O 

 11 <μl>

 2x PCR Buffer for KOD FX

 25

 2mM dNTPs

 10 (0.4mM)

 10 pmol/μl Primer  F

 1.5

 10 pmol/μl Primer  R 

 1.5

 KOD FX (1U/μl)  

 1

 Total

 50 μl





PCR 循环】



94˚C (2 min)

98℃ (10 sec.), 60˚C (30 sec.), 72˚C (40 sec.)  × 30 cycles

72℃ (7 min.)




【数据提供】
名古屋市立大学医学研究科细胞分子生物
金泽智 老师



【来自老师的评语】
使用KOD FX即便在很短的时间内也能高效率地检测出转基因。此外,positive control(lane4,9)及negative control(lane5,10)的检测灵敏度都很好,没有出现false posi。以后,在管理转基因小鼠检测转基因时仍然会用KOD FX。


 


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