用KOD FX对小鼠滤纸血进行PCR分析 |
【样品】
小鼠血液
【前处理】
【目的片段】
CIITA 450 bp
【引物】
均为21mer
【反应液组成】
dH2O | 11 <μl> |
2x PCR Buffer for KOD FX | 25 |
2mM dNTPs | 10 (0.4mM) |
10 pmol/μl Primer F | 1.5 |
10 pmol/μl Primer R | 1.5 |
KOD FX (1U/μl) | 1 |
Total | 50 μl |
【PCR 循环】
94˚C (2 min)
↓
98℃ (10 sec.), 60˚C (30 sec.), 72˚C (40 sec.) × 30 cycles
↓
72℃ (7 min.)
【数据提供】
名古屋市立大学医学研究科细胞分子生物
金泽智 老师
【来自老师的评语】
使用KOD FX即便在很短的时间内也能高效率地检测出转基因。此外,positive control(lane4,9)及negative control(lane5,10)的检测灵敏度都很好,没有出现false posi。以后,在管理转基因小鼠检测转基因时仍然会用KOD FX。