使用一步法制备的烟叶裂解液，比较用KOD One® PCR Master Mix (无染料,有染料) 及原来的酶对rbcL基因的扩增结果。

【目的片段基因名称与长度】
　rbcL　/  1.3kb
 
【引物序列】
  Forward Primer:   ATGTCACCACAAACAGAGACTAAAGC
  Reverse Primer:   AAGCAGCAGCTAGTTCCGGGCTCCA
  
【反应液的组成】        (μL)
    灭菌蒸馏水                        Y
    KOD One® PCR Master Mix 10
    10pmol/μL Primer F             0.6
    10pmol/μL Primer R            0.6
    裂解液                               0.25~1
   ------------------------------
    Total Volume 20
 
【循环条件】  
     98℃, 10sec. 30cycles
     60℃,  5sec.
     68℃,  7sec.
     (5sec. /kb)  
原来的PCR酶分别按照推荐的条件进行扩增。

【结果】
KOD One® PCR Master Mix可得到良好的扩增结果。KOD FX Neo也可以有同样的扩增结果，KOD -Plus- Neo，添加1μl裂解液则不能扩增，可见植物组分对PCR有抑制作用。



 M : 1kb DNA Ladder
 1 :裂解液 0.25μL
 2 :裂解液 0.5μL
 3 :裂解液 1.0μL

 


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