这是从使用该产品的老师那里得到的实验例。希望对实验有参考作用。
【结果】 各qPCR Mix的扩增曲线比较
A公司qPCR试剂盒
KOD SYBR® qPCR Mix
【样品】 人基因组DNA
【样品的制备方法】使用QIAGEN公司的QIAamp® DNA Mini Kit试剂盒，从液体培养的细胞中提取人的基因组DNA。
【基因名】 转录调控区
【目的片段长度】 202bp
【引物序列】 F:碱基数20 Tm值70.1 GC% 65% R:碱基数20 Tm值77.3 GC% 70%
【反应液组成】 KOD SYBR® qPCR Mix与A公司的荧光定量PCR试剂一起按以下组分进行实验。
qPCR酶mix 12.5μL
Primer F 0.5μL
Primer R 0.5μL
Template 1 μL
DDW 10.5μL
反应液 25 μL
【PCR循环】
98℃ 2min.
↓
(98℃ 10sec., 60℃ 10sec., 68℃ 30sec.)×40
↓
融解曲线分析 60℃ to 95℃
< A公司qPCR试剂盒>
94℃ 2min.
↓
(94℃ 30sec., 55℃ 30sec., 72℃ 1min.)×45
↓
融解曲线分析 60℃ to 95℃
【检测仪器】 TAKARA Thermal Cycler Dice® Real Time System TP800
【评论】
至今使用的qPCR Mix不能做的PCR, 通过KOD会得到良好的结果,非常感谢。遇到做不出来的实验时，也感觉好像见到了光明一样。谢谢！
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