●Western Blot、Dot Blot、ELISA
本试剂可作为一抗及二抗的反应液(稀释液)使用,具有提高Western Blot分析及ELISA灵敏度、特异性的功能。 |
在保持高特异性的基础上,对抗原抗体反应具有很强的促进效果,与以往的方法相比可得到高几倍到几十倍的信号。特别是对反应性低的抗体的效果更为显著。
●广泛的适用性
可用于各种使用标记抗体的化学发光检测体系、化学显色检测体系以及荧光检测体系等。
●使用方便的Ready-to-use型
已经按照使用浓度进行了配制,无须进行稀释。
1.通过Western Blot检测磷酸化蛋白质
向培养牛肾上腺髓质chromafin细胞培养液里添加任意浓度的胰岛素,进行5分钟刺激后,以细胞的裂解物为样品,通过Western Blot法检测磷酸化Akt及ERK蛋白质。结果可见,与以往方法(使用TBS-T)相比,使用Can Get Signal得到的信号明显增强而背景很低。 *数据由宫崎大学医学部药理学教研室的柳田俊彦老师提供。 2. 通过Western Blot检测EGFR |
通过Western Blot检测人的扁平上皮細胞(A431)中EGFR(Epidermal Growth Factor)的表达。以A431细胞的裂解液为样品,一抗反应用Can Get Signal® Solution 1[一抗:抗人EGFR抗体(mouse IgG1)],二抗反应用Solution 2 [二抗:抗小鼠IgG(Fab Specific, HRP标记)]进行检测。 |
另外,作为对照,用TBS-T(以往方法)进行同样的实验。结果可见,用以往方法非特异性条带很浓,几乎无法检测出目的条带,而用Can Get Signal则非特异性条带显著减少,同时可确认到信号增强。
使用无细胞蛋白质合成法合成的人来源的His-tag融合型MAP激酶(His-ERK2),通过三明治ELISA法(固相抗体:抗ERK2单克隆抗体、1抗:抗His-tag多克隆抗体、2抗:抗兔IgG-HRP抗体)进行检测。结果可见,通过在市售的封闭液中进行抗体反应的原方法,几乎得不到检测结果。而使用Can Get Signal,则无论在低浓度区域还是在高S/N比的条件下均可得到高灵敏度的检测结果。 |
【NKB-101T】
Solution 1 50ml×1瓶
Solution 2 50ml×1瓶
【NKB-101】
Solution 1 250ml×1瓶
Solution 2 250ml×1瓶
【NKB-201】
Solution 1 250ml×1瓶
【NKB-301】
Solution 2 250ml×1瓶
请另外准备Blocking试剂和检测试剂。
本试剂不适用于Blocking。
Blocking时,推荐使用PVDF Blocking Reagent for Can Get Signal®。
免疫组织染色・免疫细胞染色时,推荐使用Can Get Signal® immunostain。
●关于本产品
本品最适用于Western Blot・ELISA等实验中「受体上的抗原」于抗体的反应。
●化学发光、化学显色、荧光检测体系等均可使用。由对过氧化酶(peroxidase)、碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase)等标记抗体的活性无影响的成分构成。
●可与2抗后使用的增强灵敏度的系统一起使用。
●可用于Western Blot・Dot Blot・ELISA等。
●生物素・抗生物素抗体(Biotin・Avidin)反应
无促进效果。
●Blocking后的洗净
●1抗稀释液与Blocking液相同(或相近)的情况下可省略。
●如不同则需要洗净。
※详细可点击这里查阅。
●来自用户的心声『只需Blocking的工夫即可得到漂亮的数据』,点击这里查看详细。
1)N. Watanabe, et al., Proc Natl Acad Sci U S A., 102(33):11663-8.(2005)
2)M. Katsuno, et al., Proc Natl Acad Sci U S A; 102(46):16801-6.(2005)
3)K. Shimono, et al., J Biol Chem.,280(47):39436-47.(2005)
4)Y. Matsuzono, et al., J Biol Chem., 281(1):36-42.(2006)
5)T. Hanada, et al., Autophagy. 2:110-118.(2006)
6)T.Sugano et al.,J.Neurochemistry.98:20(2006)